(1)Richard Henderson:蛋白质电子晶体学 + 首个膜蛋白helix及电镜原子结构 + 冷冻电镜信息极限理论 + 直接电子探测器。。。其中细菌视紫红质的跨膜helix比第一个膜蛋白x-ray结构早10年,但到原子结构却耗时15年,后来X-ray的第一个膜蛋白结构拿诺奖了。。。但是,从历史全局观来看,现在的冷冻电镜把X-ray几十年的活瞬间干完了,谁的影响力更大,领域内的人都心知肚明。
(2) Joachim Frank: 单颗粒分析鼻祖,冷冻电镜最早的程序包Spider的作者(大约50多年前开发)。当年Richard 和 Nigel一开始也走上了电子晶体这条不归路,但是电子晶体学对样品要求极为苛刻,不太可能具备“普适性”(牛神也会走弯路滴,我们怕啥,呵呵)。一般而言,越底层的概念越普适,Joachim提出了一个现在看来就跟“常识”一样的观点,他认为可以不用晶体结构,直接对电子成像中的“散在的单颗粒 ”做对位(alignment)及平均来降低噪音,从而有可能获得准确取向,进而获得三维结构。作为冷冻电镜技术的基本思路,这个是非常fundamental的概念,而且完全绕过了晶体学对样品苛刻的结晶要求,使得这种方法能够处理general 的case,而不是special case,现在单颗粒电镜图像处理无论如何都饶不开这个基本概念。另外Joachim Frank在核糖体结构机理方面的贡献功不可没,虽然早年没有晶体学分辨率高。但是由于冷冻电镜革命,目前差多一天就可以解析一个核糖体结构,其影响力可见一斑!
(3)Jacques Dubochet: 虽然Bob Gleaser 和Ken Taylor是最早提出样品冷冻概念的,但是他们的方法并没有真正的work。目前认为,第一个发明真正意义上的有效的样品冷冻方法是Dubochet ,他系统研究了冰在各种冷冻条件下的状态,使得生物样品最终能够在无定形的冰中稳定存在、保持其原有的天然结构,保证样品能够成功成像。这个方法一直沿用至今,至今冷冻电镜的小盆友们每天用的方法和30多年前的其实本质上没什么两样,只不过是自动化程度更高了而已。
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