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这是文章《Calcium/calmodulin-dependent protein kinase II α and β differentially regulate mammalian sleep》的第一作者，代表本文所有作者，对Pubpeer上对本文提出的9点评论或质疑做出回应。
在做正式回应之前，我想先说明一下这篇文章的主要内容和发表理由。这篇文章的主要目的是展示一个阴性结果，也就是Camk2b敲除鼠没有NREM睡眠表型。这个结果与日本研究者Ueda, H. R.课题组声称的该基因敲除后NREM下降近2h的结果相悖1,2。我们在Communications Biology发表该结果，希望领域能够认真审视这个基因是否真的参与小鼠基础睡眠调控。
以下是针对这9条评论的具体回应：
一、关于Western blot 灰度值中部分小数尾数重复的问题（#1–3）
评论者注意到Figure 1C、1D 和Figure 2G 的部分Western blot灰度值数值具有相同的小数尾数，并据此认为这些数值“统计上异常”。
这些数值来自图像灰度定量过程，Western blot 定量值受图像灰度、ROI、像素数量、背景扣除以及软件计算和输出精度等因素共同影响。判断这些结果是否可靠，应当回到原始胶图，而不能仅依据数值末位模式进行判断。
回到质疑本身，本文所用的ImageJ灰度值定量方法，的确会产生相同尾数。在视频网站搜索同款定量方法教学视频时，可以看到，视频中按标准流程分析不同膜时，ImageJ 独立导出了多个小数尾数完全一致的灰度值（图1）。
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